平面光極分析儀(Planar Optode Analyzer)是一套精密的系統,它通過優秀的設計,將復雜的化學傳感原理與先進的光學成像技術無縫集成。其核心思想可以概括為:利用一張“智能"的化學傳感膜將不可見的化學濃度信息轉化為可見的光學信號(熒光),再用高靈敏度的相機“拍攝"下這些光學信號,最終通過軟件解碼,生成一幅幅定量的化學濃度分布圖。 讓我們層層深入,拆解這一神奇的過程。
整個系統的靈魂,是一張厚度通常只有幾十到一百微米(μm)的柔性傳感膜。這張看似普通的薄膜,是實現化學信號向光學信號轉換的關鍵。它主要由兩部分構成:高分子基質(Polymer Matrix)和嵌入其中的特異性指示劑染料(Indicator Dye)。
對溶解氧的測量是平面光極技術成熟且廣泛的應用。其原理基于一種被稱為“動態熒光淬滅"(Dynamic Fluorescence Quenching)的物理化學現象。
核心染料: 通常采用鉑(Pt)或鈀(Pd)的金屬卟啉配合物(如PtTFPP)。這類染料具有優良的光物理特性:它們被特定波長的光激發后,會發射出壽命較長(微秒級)的磷光/熒光。
- 工作原理: 氧氣分子(O?)是一種極其高效的熒光淬滅劑。當一個被激發的染料分子與一個氧氣分子發生碰撞時,染料分子會將其能量傳遞給氧氣分子,自身則以非輻射的方式返回基態,從而導致熒光發射被“淬滅"。環境中氧氣濃度越高,這種碰撞淬滅的頻率就越高,宏觀上表現為熒光強度越弱、熒光壽命越短。
定量關系: 這種關系可以用經典的斯特恩-沃爾默方程(Stern-Volmer Equation)來精確描述:
I? / I = 1 + Ksv [O?] 或 τ? / τ = 1 + Ksv [O?]
其中,I? 和 τ? 是在無氧環境下的熒光強度和壽命,I 和 τ 是在氧濃度為 [O?] 時的熒光強度和壽命,Ksv 是斯特恩-沃爾默常數,代表染料對氧氣的淬滅敏感度。通過事先標定得到Ksv,就可以根據測得的熒光強度或壽命反算出精確的氧氣濃度。測量熒光壽命相比強度更為穩健,因為它不受染料濃度、激發光強度波動等因素的影響。
高分子基質: 染料被固定在對氧氣具有高滲透性的高分子基質中,如聚苯乙烯(Polystyrene)或硅膠(Silicone)?;|的作用是為染料提供一個穩定的物理支撐,同時允許氧氣分子自由地擴散進出,與染料發生作用。
pH傳感膜的原理則有所不同,它利用了某些熒光染料的光譜特性會隨環境中質子(H?)濃度(即pH值)變化而改變的特點。
核心染料: 常用的pH指示劑染料是熒光素(Fluorescein)的衍生物或其他對pH敏感的染料。這類染料通常存在兩種形態:質子化的酸性形態和去質子化的堿性形態,這兩種形態具有不同的吸收或發射光譜。
工作原理: 以比率熒光法(Ratiometric Fluorescence)為例,染料可能在一個波長(λ?)下的熒光強度隨pH升高而增強,而在另一個波長(λ?,通常是等消光點)下的熒光強度保持不變。通過測量這兩個波長下的熒光強度比值(I? / I?),就可以建立一個與pH值精確對應的關系。這種比率測量方法非常巧妙,因為它可以消除激發光波動、染料光漂白、探測器靈敏度變化等帶來的誤差,使得測量結果極為穩定和可靠。
高分子基質: 用于固定pH染料的基質通常是親水性的水凝膠(Hydrogel),如聚丙烯酰胺,它能確保質子在膜內快速平衡。
直接測量CO?的光學傳感器較為少見,因此平面光極通常采用一種基于pH測量的間接方法,其設計靈感來源于經典的Severinghaus電極。
多層結構: CO?傳感膜結構更為復雜,它是一個“三明治"結構。最外層是一張對CO?氣體有高滲透性但對離子不滲透的疏水膜(如硅膠)。中間層是一個封裝了pH敏感染料和碳酸氫鹽緩沖液(如NaHCO?)的微小液室或水凝膠層。最內層則是一個光學隔離層,防止樣品自身的顏色或熒光干擾。
工作原理: 當樣品中的CO?分子擴散穿過最外層的疏水膜,進入中間的緩沖液層后,會與水發生反應,建立如下化學平衡:
CO? + H?O ? H?CO? ? H? + HCO??
這個反應會改變緩沖液中H?的濃度,即改變其內部的pH值。這個pH值的變化隨即被封裝在其中的pH敏感染料所感知,并通過上述的pH傳感原理轉化為熒光信號的改變。最終,通過標定熒光信號與外部CO?濃度的關系,實現對CO?的定量測量。這種方法的響應時間通常比DO和pH傳感稍慢,因為它涉及氣體的跨膜擴散和化學平衡的建立過程。
此外,為了確保測量的準確性,所有傳感膜的最外層通常還會涂覆一層黑色的光學隔離層(Optical Isolation Layer),以阻止環境光和激發光直接照射到樣品上,并防止樣品自身的熒光或顏色干擾測量,確保相機捕捉到的是純凈的、僅來自傳感膜的信號。